Invitrogen™ CyQUANT™ MTT and XTT Cell Viability Assays

Description

CyQUANT MTT and XTT Cell Viability assays are colorimetric microplate assays used to measure the metabolic activity of cells, which is an indicator of cell viability, proliferation, and cytotoxicity. CyQUANT MTT and XTT function as cell health indicators by using the cellular redox potential of live cells to convert a tetrazolium-based salt reagent, MTT or XTT, to a brightly colored formazan product. The absorbance of the formazan can be measured using a microplate reader and correlates with the number of metabolically active cells to quantitively measure cell viability and proliferation.

Le kit comprend deux réactifs, le réactif XTT et le réactif de couplage d’électrons. Le réactif XTT est utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire comme fonction du potentiel redox cellulaire et le réactif de couplage d’électrons améliore la plage dynamique du dosage.

L'essai est suffisant pour dix plaques de 96 puits et se compose de 10 flacons de réactif XTT et de 10 tubes de réactif de couplage d’électrons. Un flacon de chacun (suffisant pour une plaque de 96 puits) est décongelé, mélangé, ajouté aux cellules et incubé. Le signal de viabilité est détecté à l’aide d’un lecteur de microplaques basé sur l’absorbance. Dans des cellules mammifères viables respirant activement, le réactif XTT hydrosoluble est réduit et converti en formazan de couleur orange.

Caractéristiques du dosage de viabilité cellulaire CyQUANT™ XTT :
• Dosage hautement reproductible de la viabilité basé sur l’absorbance
• Amélioration de la plage dynamique et de la sensibilité par rapport aux autres dosages de viabilité colorimétriques
• Format pratique, configuré pour une plaque de 96 puits, il suffit de mélanger et de lire les résultats
•Dosage continu, non toxique — Collecte possible de plusieurs points temporels, aucune lyse cellulaire

La mesure des changements de la prolifération cellulaire est une méthode fondamentale pour apprécier la santé des cellules, déterminer la génotoxicité et évaluer les médicaments anticancéreux. En plus d’être rentables, les dosages de viabilité colorimétriques génèrent des résultats cohérents avec une faible variabilité de puits à puits. Contrairement à d’autres dosages de viabilité de cellules de mammifères colorimétriques disponibles dans le commerce, les dosages basés sur XTT affichent une plage dynamique élevée et une faible variabilité. En plus d’améliorer les performances, le dosage est un dosage continu et ne nécessite aucune lyse cellulaire ni solubilisation.

Le dosage de viabilité cellulaire CyQUANT™ XTT est un kit complet et optimisé pour la détection de la viabilité des cellules des mammifères. Le kit de dosage comprend le réactif XTT (2,3-bis-(2-méthoxy-4-nitro-5-sulfophényl)-2H-tétrazolium-5-carboxanilide) et le réactif de couplage d’électrons. Le réactif XTT, qui est un composé à base de tétrazolium, est sensible au potentiel redox cellulaire et, en présence de cellules respirant activement, il passe d’un composé hydrosoluble à un produit formazan de couleur orange. La sensibilité et la cohérence du dosage sont significativement augmentées lorsqu’il est utilisé avec le réactif de couplage d’électrons.

Étant donné qu’aucune lyse cellulaire ni solubilisation n’est nécessaire pour la détection, le dosage XTT peut être utilisé comme dosage continu et plusieurs moments peuvent être analysés. De plus, le dosage CyQUANT™ XTT génère des résultats de viabilité à partir de divers types de lignées cellulaires, y compris les cellules primaires et les cellules en suspension.

Pour chaque plaque de 96 puits, un flacon de réactif XTT et un tube de réactif de couplage d’électrons sont décongelés, mélangés pour créer une solution mère et ajoutés aux cellules, avec une viabilité cellulaire détectée après une incubation de 2 à 4 heures. Le kit de dosage fournit tous les matériaux nécessaires pour dix plaques de 96 puits.

Il est recommandé d’utiliser la solution mère de réactif de couplage d’électrons/XTT peu de temps après le mélange. Les performances du dosage sont compromises et la sensibilité est réduite si la solution mère est maintenue à température ambiante pendant de longues périodes ou soumise à des cycles de congélation/décongélation. Pour garantir les performances et la reproductibilité des dosages, le dosage de viabilité cellulaire CyQUANT™ XTT est composé des réactifs XTT et de couplage d’électrons séparés qui sont mélangés.