IBA Lifesciences Kit MB d’isolement Fab Streptamer™ pour CD4+ CD62L+ CD45RA- Tcm

Description

• Microbilles magnétiques Strep-Tactin™ pour Fab Streptamers™ ; 4 flacons de 5 x 10⁸ cellules chacun
• Fab-Strep pour CD4, isolement des cellules T humaines ; 1 flacon de 1 x 10⁹ cellules
• Fab-Strep pour CD62L, isolement des cellules T humaines ; 1 flacon de 5 x 10⁸ cellules
• Fab-Strep pour CD45RA, isolement des cellules T humaines ; 1 flacon de 5 x 10⁸ cellules
• Solution mère de biotine pour la technologie Streptamer™ ; 3 x 1 ml
• Tampon IS, tampon de lavage Streptamer™, 10 x concentré ; 2 x 50 ml
• L’isolement des cellules T à mémoire centrale CD4+ CD62L+ CD45RA est effectué par double sélection positive en série et par une étape de déplétion. Dans une première étape, les PBMC sont marqués avec Fab Streptamers™ magnétiques pour CD4. Les cellules marquées sont isolées dans un aimant puissant (StrepMan, position horizontale) où elles migrent vers la paroi du tube du côté de l’aimant. Cette fraction de cellules positives CD4 est collectée et les cellules sont libérées de tous les réactifs de marquage par addition de biotine dans un aimant puissant (StrepMan, position verticale). Les Streptamers™ magnétiques migrent vers la paroi du tube et les cellules sans marquage restent dans le surnageant. La biotine est éliminée par lavage. Les cellules CD4 positives pures et sans marquage sont soumises à une deuxième sélection positive avec Fab Streptamers™ magnétiques pour CD62L, en suivant la même procédure. Les cellules T CD4+ CD62L+ sont ensuite soumises à une étape de déplétion avec Fab Streptamers™ pour CD45RA.
• La préparation cellulaire qui en résulte est fortement enrichie en cellules T à mémoire centrale CD4+ CD62L+ CD45RA d’une pureté supérieure à 90 %. Aucune colonne n’est nécessaire.