Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA polymerases set a gold standard for high performance PCR. Featuring an error rate 50-fold lower than that of Taq and 6-fold lower than that of Pfu, Phusion High-Fidelity DNA Polymerase is excellent choice for cloning and other applications requiring high fidelity. Phusion DNA polymerases offer robust performance with short protocol times, even in the presence of PCR inhibitors, and generate higher yields with lower enzyme amounts than other DNA polymerase.
L’ADN polymérase Phusion Hot Start II High-Fidelity à démarrage à chaud associe l’ADN polymérase Phusion et un ligand spécifique Affibody lié de façon réversible. Le ligand Affibody inhibe l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante et empêche ainsi l’amplification de produits non spécifiques.
Le ligand Affibody inhibe également l’activité exonucléase 3‡ → 5‡ de la polymérase, empêchant la dégradation des amorces et de l’ADN modèle pendant la configuration de la réaction. À des températures de polymérisation, le ligand est libéré, rendant la polymérase pleinement active. L’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud ne nécessite pas d’étape d’activation distincte dans le protocole PCR, car elle est immédiatement réactivée à des températures élevées.
La nouvelle ADN polymérase Phusion Green Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité est une combinaison d’ADN polymérase Phusion Hot Start II et des tampons 5X Phusion Green. Les tampons contiennent un réactif de densité et deux colorants de suivi qui favorisent le chargement direct des produits issus de la PCR sur un gel. Le tampon coloré n’interfère pas avec les excellentes performances de l’ADN polymérase Phusion Hot Start II et est compatible avec des applications en aval, telles que le séquençage, la ligature et la digestion par des enzymes de restriction de l’ADN.
L’ADN polymérase Phusion Hot Start II High-Fidelity est la polymérase d’ADN à démarrage à chaud la plus précise du marché. Elle associe l’ADN polymérase Phusion et un ligand spécifique Affibody lié de façon réversible. L’Affibody inhibe l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante et empêche ainsi l’amplification de produits non spécifiques. Le ligand Affibody inhibe également l’activité exonucléase 3’ → 5’ de la polymérase, empêchant ainsi la dégradation des amorces et du modèle d’ADN durant l’installation de la réaction. À des températures de polymérisation, le ligand est libéré, rendant la polymérase pleinement active. L’ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud ne nécessite pas d’étape d’activation distincte dans le protocole PCR, car elle est immédiatement réactivée à des températures élevées. La nouvelle ADN polymérase Phusion Green Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité est une combinaison d’ADN polymérase Phusion Hot Start II et des tampons 5X Phusion Green. Les tampons contiennent un réactif de densité et deux colorants de suivi qui favorisent le chargement direct des produits issus de la PCR sur un gel. Le tampon coloré n’interfère pas avec les excellentes performances de l’ADN polymérase Phusion Hot Start II et est compatible avec des applications en aval, telles que le séquençage, la ligature et la digestion par des enzymes de restriction de l’ADN.
Points clés
Possibilité de préparation de la réaction à température ambiante
Réduction de l'amplification non spécifique
Empêche la dégradation de l’amorce lors de la préparation
Aucune réactivation nécessaire grâce à la technologie Hot Start (démarrage à chaud)
Fidélité extrême (52X Taq)
Vitesse de la polymérase diminuant les temps d'extension
Rendement accru du produit avec un volume minimum d'enzyme
Chargement direct sur gel avec tampon vert
Applications
PCR haute fidélité
Haut débit
Modèles difficiles (riches en GC)
Génération de modèle à des fins de séquençage
PCR multiplex
PCR longue portée
Clonage
Mutagénèse†
Microarray
†Kit de mutagénèse dirigée Phusion également disponible.
Comprend ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité
ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité (2 U / μl)
5 X Tampon Phusion HF
5 X Tampon Phusion GC
DMSO
Solution de 50 mM de MgCl2
ADN polymérase Phusion Green Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité
ADN polymérase Phusion Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité (2 U / μl)
5 X Tampon Phusion Green HF
5 X Tampon Phusion Green GC
DMSO
Solution de 50 mM de MgCl2
Les tampons Phusion et Phusion Green fournissent tous deux 1,5 mM de MgCl2 à la concentration finale 1X.
Danger : non Durée de conservation : 24 mois Conditions d’expédition : Glace carbonique Tampon de stockage : 20 mM de Tris-HCl (pH 7,4 à 25°C), 0,1 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 100 mM de KCl, stabilisants, 200 μg / ml de BSA et 50 % de glycérol. Conditions de conservation : − 20°C
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