Invitrogen™ Enzyme CorrectASE™

Description

L’enzyme Invitrogen™ CorrectASE™ élimine les erreurs de correspondance causées par les erreurs de synthèse des oligonucéotides, ce qui entraîne une réduction de l’ordre de 3 – 10 de la quantité de mutations dans vos gènes ou fragments synthétiques. En introduisant l’enzyme CorrectASE™ dans votre flux de travail de synthèse de gènes do-it-yourself, vous pouvez :

• Réduire le nombre de mutations dans votre gène ou fragment synthétique
• Réduisez votre temps de main-d’œuvre en sélectionnant uniquement 2–4 clones au lieu de 10 à 16 clones par construction synthétique
• Réduisez vos coûts grâce au séquençage de 2–4 clones uniquement au lieu 10–16 de gènes synthétiques

Évitez les mutations indésirables
Les oligonucéotides synthétiques disponibles dans le commerce présentent un taux d’erreur élevé pendant la synthèse, allant d’un par 300–1 000 bases, selon la source. Ces erreurs provoquent le changement de cadre (suppression et insertion) et des mutations de discordance lors de la synthèse génétique. L’incubation avec l’enzyme CorrectASE™ élimine les deux types de mutations.

L’étape d’incubation avec l’enzyme CorrectASE™ est introduite après l’assemblage initial de PCR des oligonucléotides. Le produit PCR est dénaturé et rerecuit de façon à ce que toutes les mutations soient inégalées. L’enzyme CorrectASE™ se lie aux erreurs résultantes et entaille les deux brins d’ADN 3’ de l’erreur. L’activité exonucléase à 3’ à 5’ de l’enzyme élimine les erreurs. Une PCR finale avec une polymérase d’épreuve assemble ensuite les fragments corrigés, augmentant ainsi la probabilité d’isoler les clones avec la séquence correcte. En fonction de la qualité des oligonucléotides entrants, seuls 2–4 clones doivent être sélectionnés, par rapport aux 10–16 clones dans un flux de travail qui n’inclut pas l’étape de correction. L’inclusion de l’enzyme CorrectASE™ dans votre flux de travail de synthèse génétique réduit le temps de main-d’œuvre et les coûts de séquençage.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales, quelles qu’elles soient.