Invitrogen™ Kit de clonage TOPO™ TA™ pour le sous-clonage, sans cellules compétentes

Description

Chaque kit utilise le vecteur pCR™ 2.1-TOPOTA avec des sites de restriction pratiques pour le sous-clonage. Les kits de clonage sont disponibles dans une vaste gamme de cellules compétentes (disponibles séparément), ou sans cellules compétentes, selon vos besoins et votre budget. Résistant à la kanamycine (KanR) et à la Zeocin™ (ZeoR).

Vecteur TA pCR™ 2.1-TOPO : clonage et sous-clonage simples
Le vecteur TA pCR 2.1-TOPO est linéarisé avec des saillies 3’ de thymidine (T) pour une ligature directe des produits de PCR amplifiés par polymérase Taq (clonage TA) et est “activé” avec la topoisomérase I liée par covalence. L’ajouter de ligase n’est pas nécessaire et le clonage est réalisé en 5 minutes. Les sites EcoRI flanquant le site d’insertion du produit PCR permettent une excision facile des inserts ou utilisent n’importe quelle combinaison de 15 sites de restriction pratiques flanquant votre insert PCR pour un sous-clonage directionnel facile.

Sélection et manipulation des clones pCR 2.1-TOPO TA
Le vecteur TA pCR 2.1-TOPO contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et le gène LacZα pour la sélection bleu/blanc.

Clonage simplifié basé sur TOPO
Grâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer les cellules compétentes E. coli.

Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TA pCR 2.1 polymérase-TOPO utilisé dans ce kit est livré avec des saillies de 3’- T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés par polymérase Taq, qui contiennent des saillies de 3’A.

La norme du clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple à utiliser et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.

Kits de sous-clonage TOPO TA Cloning : options de kit
Le kit de séquençage TOPO TA Cloning peut être acheté avec une variété de cellules compétentes offrant différents avantages selon vos besoins :

• Clonage général : Cellules TOP10 (No de catalogue K4500-01, K4500-40)
• Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K4560-01, K4560-40)
• Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : Cellules DH5α-T1R (No de catalogue K4520-01, K4520-40)
• Croissance rapide : Mach1™ -T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K4510-20)
• Fournissez le vôtre : pour plus de souplesse et économiser de l’argent (No de catalogue de réf. 450641)

• Rapide et simple : seulement trois étapes, réalisées en cinq minutes à peine, séparent le clonage de la PCR
• Efficace : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
• Résultats prouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
• Simple : aucune ligase, procédure post-PCR ou amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques n’est requise
• Vecteur : vecteur TA pCR 2.1-TOPO : vecteur de sous-clonage avec 15 sites de restriction pratiques qui flanquent votre insert pour un sous-clonage directionnel facile
• Méthode de clonage : TOPO TA Cloning : topoisomérase I, ligature en 5 minutes des produits PCR avec des saillies 3′-A (amplification avec des polymérases Taq) sur le vecteur TOPO avec des saillies T
• Cellules compétentes : plusieurs options, choisissez parmi les kits qui proposent des cellules compétentes (disponibles séparément) générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide ; ou utilisez les vôtres

Clonage, clonage par PCR