Molecular Probes™ Colorants indicateurs de pH intracellulaire AM pHrodo™ Red et Green

Description

Mesurez et quantifiez le pH intracellulaire avec les colorants indicateurs AM pHrodo Red et Green, qui sont des sondes fluorogéniques qui traversent la membrane cellulaire et restent dans l’espace intracellulaire lors du clivage par des estérases non spécifiques. Les colorants indicateurs AM pHrodo rouges et verts deviennent de plus en plus fluorescents lorsque le pH diminue et peuvent être utilisés pour quantifier le pH cytosolique dans la plage de 4–9. Ces colorants indicateurs peuvent également être utilisés dans des expériences multiplex au sein des applications HCS, cytométrie en flux, fluorométrie dans microplaques et HCS.

Les indicateurs de pH intracellulaires pHrodo Red (réf. catalogue P35372) et Green (réf. catalogue P35373) sont des sondes fluorogènes utilisées pour mesurer le pH intracellulaire dans les cellules vivantes. Ils sont faiblement fluorescents à pH neutre mais de plus en plus fluorescents lorsque le pH diminue. Ces réactifs peuvent être utilisés pour quantifier le pH cytosolique cellulaire dans une plage de 4–9 avec une pKa de ∼6,5 et avec des spectres d’excitation/émission de 560/585 nm (pHrodo Red) ou de 509/533 nm (pHrodo Green).

Les colorants indicateurs pHrodo Red et pHrodo Green sont photostables et adaptés à une utilisation dans les expériences de multiplexage. pHrodo Red se multiplexe facilement avec une grande variété de colorants et de rapporteurs bleu, vert et rouge lointain tels que GFP, Fluo-4, calcéine, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 vert, Mitosox vert et Mitotracker rouge profond, entre autres. Le pHrodo Green se multiplexe facilement avec une grande variété de colorants et rapporteurs bleu, rouge et rouge lointain, tels que Mitosox rouge, CellEvent Caspase 3/7 rouge, NucBlue, RPS et Mitotracker rouge profond, entre autres.

Ces colorants pHrodo Red et Green ont été modifiés avec des groupes d’ester AM, ce qui donne lieu à une molécule non chargée qui peut pénétrer dans les membranes cellulaires. Une fois à l’intérieur de la cellule, les groupes bloquants lipophiles des colorants sont clivés par des estérases non spécifiques, ce qui entraîne des composés qui sont retenus dans l’espace intracellulaire. L’intensité de fluorescence de la sonde est alors un indicateur du pH intracellulaire. L’utilisation ultérieure du kit de tampon d’étalonnage du pH intracellulaire (réf. catalogue P35379) permet de quantifier ce pH intracellulaire.

Les colorants indicateurs de pH intracellulaire AM pHrodo Red et Green sont compatibles avec diverses plateformes, telles que la microscopie par fluorescence traditionnelle, le criblage à haut contenu (HCS), la cytométrie en flux et la fluorimétrie basée sur microplaques ou le criblage à haut débit (HTS). Ces réactifs sont également compatibles avec la microscopie par fluorescence grand champ ou confocale, la cytométrie en flux, les lecteurs de plaques de fluorescence et les instruments de grande capacité.