Thermo Scientific™ Pierce™ Antibody Biotinylation Kit for IP

Description

Les réactifs du kit de biotinylation des anticorps Pierce ont été optimisés et validés pour les anticorps marqués à la biotine pour les réactions d’IP et de co-IP. La détermination du nombre optimal de biotines à fixer à la molécule cible est l’une des principales difficultés de la biotinylation. Pour les applications d’IP et co-IP, une quantité de biotine trop élevée se traduit par une réduction de l’affinité pour l’antigène cible, alors qu’une quantité de biotine insuffisante entraîne le lessivage des anticorps lors de l’élution de l’antigène cible. La procédure de marquage de la biotine dans le kit de biotinylation d’anticorps Pierce pour immunoprécipitation a été développée pour relever ce défi.

Le kit de biotinylation d’anticorps Thermo Scientific™ Pierce™ pour l’immunoprécipitation fournit des réactifs de biotinylation conçus spécifiquement pour le marquage des anticorps primaires utilisés dans les applications d’immunoprécipitation.

• Optimisé pour l’immunoprécipitation : les réactifs et les protocoles conçus spécifiquement pour traiter le marquage des anticorps pour les applications d’immunoprécipitation
• Facile à utiliser : configuration du kit spécialement optimisée pour accueillir 50 à 200 μg d’anticorps dans une réaction de 100 μl ; des colonnes de dessalage sont fournies pour éliminer l’excès de réactif de biotinylation après le marquage
• Réactif aux amines : réagit avec les amines primaires (-NH2) des anticorps
• Solubilité accrue : la pegylation améliore la solubilité dans l’eau de l’anticorps biotinylé et empêche l’agrégation lors du stockage
• Réduction de l’encombrement stérique : le bras espaceur plus long (29 angströms) minimise l’encombrement stérique lors de la liaison aux molécules d’avidine

Le kit contient suffisamment de réactifs pour marquer 50 à 200 μg d’anticorps dans des volumes de réaction de 100 μl pour huit échantillons. Le réactif de marquage à la biotine NHS-PEG4 contient un groupe d’esters N-hydroxysuccinimide (NHS) réactifs aux amines et un espaceur PEG4 hydrosoluble pour un marquage optimal. Il est fourni dans des microtubes à usage unique faciles à utiliser. L’efficacité de marquage du réactif de biotinylation et l’affinité de liaison de l’anticorps marqué ont été validées avec des anticorps monoclonaux de souris (IgG1, IgG2), ainsi que des anticorps monoclonaux et polyclonaux de lapin. Les colonnes de centrifugation de dessalage Zeba™ sont fournies pour éliminer de manière simple et efficace des sels et l’excès de biotine.

Applications :

• IP et co-IP
• IP et co-IP pour les applications de spectrométrie de masse
• Fixation d’anticorps à la streptavidine-agarose et aux supports magnétiques