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Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli
Offre une stratégie de clonage rapide en une étape permettant d’insérer directement des produits de PCR amplifiés par A Taq dans un vecteur plasmide
Marque: Invitrogen™ K205040
660.00 EUR valable jusqu'au 2024-12-31
Utilisez le code promo "21651" pour bénéficier de cette offre.
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Description
Les promoteurs T7 et Sp6 du vecteur pCR II permettent une transcription in vitro de l’insert en vue de générer des produits de type sens et antisens. Le kit TA Cloning Dual Promoter s’appuie sur le vecteur de clonage pCRII et la ligase d’ADN ExpressLink T4 de façon à générer, à température ambiante et en quinze minutes, un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir > 80 % de produits recombinants comportant des inserts.
- Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
- Efficacité : analyse des bleus / blancs et > 80 % de clones avec insert correct
- Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
- Simplicité : élimination de toute modification enzymatique du produit PCR
- Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire
- Saillies 3’-T pour la ligature directe de produits PCR amplifiés par Taq
- Accélérateurs de T7 et Sp6 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
- Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
- Sites d’amorce M13 directs et inversés pour le séquençage
- Fonctionnement du TA Cloning\
- L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique aux extrémités 3’ des produits de PCR.
- Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de désoxythymidine 3’ (T) simple.
- Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.
- Configurations du kit
- Le kit TA Cloning est proposé dans différentes configurations : avec des cellules chimiquement compétentes INVF’ E. coli One Shot (K2050-01 et K2050-40), des cellules chimiquement compétentes TOP10F’ E. coli One Shot (K2060-01 et K2060-40), et sans des cellules chimiquement compétentes (K2750-20 et K2750-40), dans des configurations à 20 ou 40 réactions.
Clonage, clonage par PCR
Spécification
| INVαF ́ | |
| TA Cloning | |
| Kit | |
| Vecteur pCRII linéarisé, ligase d’ADN ExpressLink T4, 5 tampons de ligature d’ADN ExpressLink T4, dNTP, 10 tampons PCR, eau stérile, témoins, cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot™INVαF’, milieu S.O.C. et plasmide témoin superenroulé. | |
| One Shot™ | |
| T7, SP6 | |
| pCRII |
| E. coli chimiquement compétentes | |
| Ce kit contient un vecteur pCR™II linéarisé, une ligase d’ADN ExpressLink™ T4, 5 tampons de ligature d’ADN ExpressLink™ T4, des dNTP, 10 tampons PCR, de l’eau stérile et des témoins. Les kits cellulaires compétents contiennent des cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™, un milieu S.O.C. et un plasmide de contrôle superenroulé. Conserver les cellules E. coli One Shot™ à -80°C. Conserver tous les autres composants à -20°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois, sous réserve d’une bonne conservation. |
|
| Clonage PCR | |
| 40 réactions | |
| Kit de clonage | |
| 40 rxns |
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