Invitrogen™ Système de synthèse premier brin SuperScript™ IV

Description

Optimisé pour la synthèse d’ADNc premier brin à partir de poly(A)+ purifié ou d’ARN total.

Le kit contient la transcriptase inverse (RT) SuperScript™ IV, un mutant exclusif du M-MLV qui produit une synthèse robuste et fiable d’ADNc dans les réactions RT. Le système de synthèse SuperScript IV a été sensiblement amélioré par rapport au système SuperScript III en termes de résistance aux inhibiteurs, de processivité et de vitesse de réaction, tout en conservant tous les avantages du système précédent, notamment une thermostabilité supérieure, une synthèse d’ADNc pleine longueur très efficace et une activité ARNase réduite. Le système SuperScript IV est conçu pour fournir une synthèse fiable, cohérente et rapide de l’ADNc en présence d’inhibiteurs trouvés dans une grande variété d’échantillons qui font que d’autres RT actuellement disponibles ne fonctionnent pas efficacement.

Le système de synthèse premier brin SuperScript IV contient tous les composants nécessaires aux réactions RT, ainsi qu’un gène de contrôle supplémentaire et des amorces. Il offre la flexibilité nécessaire pour personnaliser la configuration de la RT en fonction des besoins de votre application. Le système de synthèse SuperScript IV est le choix idéal pour assurer une performance et une flexibilité exceptionnelles pour les applications RT-PCR. Nous le recommandons pour toutes les applications RT-PCR, tout particulièrement lorsque la reproductibilité et la fiabilité sont des préoccupations majeures et lorsque les inhibiteurs de l’échantillon d’ARN risquent d’interférer avec la synthèse d’ADNc, conduisant à des résultats biaisés dans les études d’expression génétique.

Les caractéristiques du système de synthèse premier brin SuperScript IV comprennent :

• Meilleure résistance à toute une variété d’inhibiteurs qui peuvent interférer avec la synthèse d’ADNc
• Synthèse d’ADNc spécifique et robuste dans une large gamme de types d’échantillons
• Une réaction catalysée par la transcriptase inverse plus rapide, avec réduction du temps d’incubation qui passe de > 50 à 10 min
• Processivité bien meilleure par rapport à la RT SuperScript III

Source enzymatique
Purifiée à partir d’E. coli exprimant le gène pol de M-MLV, modifiée pour augmenter la thermostabilité et la demi-vie, la processivité, la résistance aux inhibiteurs et pour réduire l’activité de RNase H.

Tests de performance et de qualité des dosages
Dosages d’endodésoxyribonucléases, d’exodésoxyribonucléases et de ribonucléases ; rendement et longueur du produit d’ADNc.

Définition de l’unité
Une unité de la RT SuperScript IV est la quantité d’enzymes nécessaire pour incorporer 1 nmol de désoxyribonucléotides dans un matériau précipitable à l’acide en 10 min à 37°C en utilisant le poly(A) oligo(dT)12-18 comme modèle / amorce.

Conditions de réaction unitaire
50 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM de MgCl2, 10 mM de DTT, 50 mM de KCl, 0,5 mM de dTTP, 0,4 MBq/ml de [3H]-dTTP, 0,4 mM de poly(A) oligo(dT)12 à 18 et enzyme dans 20 μl pendant 10 min à 37°C.