Learn More
Thermo Scientific™ Pierce™ Phosphoprotein Phosphate Estimation Assay Kit
Classifiez et identifiez les protéines comme phosphorylées (sérine et thréonine) et obtenez une évaluation semi-quantitative des niveaux de phosphorylation.
Marque: Thermo Scientific™ 23270
Code nomenclature Nacres: NA.32
Informations supplémentaires : Poids : 0.10000kg
Description
Le kit d’estimation de la teneur en phosphate des phosphoprotéines Thermo Scientific™ permet de classifier et d’identifier des protéines phosphorylées (sérine et thréonine), et également de réaliser une évaluation semi-quantitative du niveau de phosphorylation.
Le kit d'estimation de la teneur en phosphate des phosphoprotéines est conçu pour faciliter la caractérisation de l'état et de l'étendue de la phosphorylation des échantillons protéiques purifiés. Le dosage est basé sur l'hydrolyse alcaline du phosphate des résidus séryle et thréonyle dans les phosphoprotéines et sur la quantification du phosphate libéré par le vert malachite et le molybdate d'ammonium. Le dosage, qui dure environ une heure, peut être facilement réalisé dans des microplaques à 96 puits ou dans des tubes à essai.
Le dosage peut permettre d'identifier si une protéine purifiée contient des phospho-sérines (p-Ser) ou des phospho-thréonines (p-Thr) et peut être utilisé pour estimer le niveau de ce type de phosphorylation. Pour la quantification, l'échantillon protéique de test est comparé à des concentrations spécifiques de phosvitine, une phosphoprotéine ayant un niveau de phosphorylation connu. L'étape d'hydrolyse alcaline ne libère pas le phosphate des résidus phospho-tyrosine (p-Tyr) dans la liaison peptidique. Par conséquent, un résultat négatif pour une préparation protéique purifiée inconnue indique que la protéine (1) n’est pas une phosphoprotéine ou (2) est exclusivement phosphorylée au niveau des résidus tyrosine. Dans ce dernier cas, il sera nécessaire de réaliser une analyse par transfert Western avec un anticorps anti-phosphotyrosine afin de différencier les deux possibilités.
Points clés :
Spécifique : permet de mesurer la phospho-sérine (p-Ser) phospho-thréonine (p-Thr) uniquement ; ne mesure pas la phospho-tyrosine (p-Tyr)
- Pratique : les protocoles de tubes à essai et de microplaques à 96 puits sont inclus et nécessitent moins de 90 minutes
Semi-quantitatif : permet de calculer les moles de phosphate (P) par mole de protéine en utilisant l’étalon de phosvitine inclus
Personnalisable : lorsque des étalons préalablement caractérisés sont disponibles, le format peut être adapté au développement de dosages spécifiques pour des phosphoprotéines pures
Comprend :
Solution de molybdate d’ammonium, solution de vert malachite, pack de solution saline tamponnée au Tris et contrôle positif phosvitine
Recommandé dans les cas suivants :
Identification des protéines contenant des phosphorylations phospho-sérine ou phospho-thréonine ; Estimation de la quantité de phosphorylation pS et pT ; Développement de dosages quantitatifs spécifiques pour des phosphoprotéines d’intérêt bien caractérisées
Spécification
Suffisant pour : 500 dosages en tube ou 1 920 dosages sur microplaque • Solution de molybdate d’ammonium, 25 ml • Solution verte de malachite, 75 ml • Contrôle positif de phosvitine, 1 mg • Boîte de TBS (donne 500 ml), 1 boîte Dès réception, stocker les composants à température ambiante. Une fois dissoute, stocker la solution de phosvitine à 4°C (ou -20°C pour le stockage à long terme). |
|
Colorimétrique | |
Estimation du phosphate des phosphoprotéines | |
500 dosages en tube ou 1920 dosages sur microplaques | |
Spectrophotomètre, lecteur de microplaques |
Dosage d’estimation du phosphate des phosphoprotéines | |
Pierce™ | |
Non spécifique à la cible | |
Détection basée sur une solution, absorbance | |
100 ml |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.