Thermo Scientific™ ManNAz (N-azidoacetylmannosamine tetraacylated)

Les sucres sont des dérivés d’azoture de monosaccharides naturels que les cellules utilisent pour les protéines de glycosylate à l’aide de voies biochimiques de modification post-translationnelle. Le groupe fonctionnel azoture est petit et non réactif avec des molécules endogènes. Lorsqu’ils sont fournis aux cellules, ces composés sont incorporés par des événements de glycosylation pour “marquer” efficacement les glycoprotéines avec le groupe azoture. Le groupe azoture peut alors être efficacement et spécifiquement ciblé pour la détection ou la conjugaison à l’aide de réactifs activés par l’alcyne (chimie “clic”) ou de réactifs activés par la phosphine (ligature de Staudinger). Ainsi, lorsqu’ils sont utilisés en association avec des colorants fluorescents activés par la phosphine, des réactifs de biotine et d’autres composés, ces sucres modifiés par l’azido facilitent l’étude des voies cellulaires impliquant la glycosylation. Il existe plusieurs classes de glycoprotéines regroupées par type de site de liaison des glucides et des acides aminés. La glycosylation liée en N est une modification des amines de l’asparagine, alors que la glycosylation liée en O se produit par l’hydroxyle des résidus de sérine et de thréonine. Les sucres modifiés par l’azido sont des substituts bioorthogonaux des sucres aminés endogènes. ManNAz est converti par les cellules en un dérivé acide sialique azido utilisé pour la glycosylation liée en N des protéines de surface cellulaire. GlcNAz et GalNAz sont principalement utilisés pour marquer la glycosylation liée en O (O-GlcNAc et O-GalNAc).

Points clés :

• Bioorthogonal : le groupe azido est petit, non réactif et absent des systèmes vivants ; en tant que tels, les composés azido-sucre n’interfèrent pas avec les voies cellulaires endogènes et ne remplacent pas leurs analogues naturels

• Compatible : la chimie de la réaction avec les composés phosphine se produit efficacement dans des conditions de tampon simples ; ne nécessite aucun réactif accessoire tel que le cuivre ou les agents réducteurs

• Chimiosélective : les groupes azotures et phosphine ne réagissent pas et n’interfèrent pas avec les composants des échantillons biologiques mais se conjuguent les uns avec les autres avec une grande efficacité

• Polyvalent : le “tag” azoture peut être ciblé pour la détection, l’immobilisation, la conjugaison ou la purification par affinité en fonction du composé activé par la phosphine avec lequel elle réagit