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OPTIZYME™ SacI, Fisher BioReagents™

Marque:  Fisher BioReagents BP8016-1

Code produit. 11914782

  • 303.00€ / 1 pièce

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Description

Description

5’…G A G C T^C...3’
3’…C^T C G A G...5’

Fourni avec : OPTIZYME 10X Ecl136II, tampon Sacl
Conditions pour 100 % d’activité :

  • 1Tampon X OPTIZYME Ecl136II, SacI : 10 mM de bis-tris propane-HCl (pH 6,5 à 37°C), 10 mM de MgCl2 et 0,1 mg/ml de BSA
  • Laissez incuber à 37°C
Activité enzymatique dans les tampons OPTIZYME :
  • Tampon 1 : 50 - 100 %
  • Tampon 2 : 20 - 50 %
  • Tampon 3 : 0 - 20 %
  • Tampon 4 : 50 - 100 %
  • Tampon 5 : 0 - 20 %
Tampon de stockage :
  • 10mM de tris-HCl (pH 7,4 à 25°C), 100 mM de KCI, 1 mM de DTT, 1 mM d’EDTA, 0,2 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol
  • Ligature et nouveau clivage :
  • Plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une surdigestion 50 fois plus importante avec SacI.
  • Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
  • Un minimum de 5 unités de Sacl est requis pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.
  • Remarques :
    • SacI est sensible à la méthylation des cytosines dans la séquence GAGmCTC mais pas dans GAGCTmC et insensible à la méthylation de l’adénine dans la séquence GmAGCTC/. AluI méthyltransférase (AGmCT) peut être utilisé pour bloquer SacI.
    • Les plasmides surenroulés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de SacI que l’ADN linéaire pour une digestion complète.
    • SacI est inhibé par les anticoagulants cliniques courants que l’on trouve dans certaines préparations de sang périphérique anticoagulé et de moelle osseuse. Les concentrations d’EDTA et d’ACD (acide citrique-citrate de sodium-dextrose) dans la préparation d’échantillons standard provoquent l’inhibition de SacI. Une concentration d’héparine 3 fois supérieure à la normale est nécessaire pour inhiber SacI.
    Extrémités compatibles : Alw21I, Eco24I, SduI
    Effets de méthylation :
    Dam : Ne se chevauche jamais - aucun effet
    Dcm : Ne se chevauche jamais - aucun effet
    CpG : Possibilité de chevauchement - aucun effet.
    • 5’…m5C GAGCTm5C G...3’
  • 3’… Gm5CTCGA Gm5C...5’
  • (Aucun effet sur le clivage)
  • EcoKI : Ne se chevauche jamais - aucun effet
  • EcoBI : Possibilité de chevauchement - aucun effet.
    • 5’…TGm6AGCTC(N)4 TGCT...3’
  • 3’…AC TCGAG(N)4 m6ACGA...5’
  • (Aucun effet sur le clivage)

    • TRUSTED_SUSTAINABILITY
    Spécification

    Spécification

    10 U/μl
    37°C
    > 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive multipliée par 50 avec SacI
    2000 U
    Sacl
    10X OPTIZYME™ Ecl136II, tampon SacI
    7,4
    10 mM de Tris HCl (pH 7,4 à 25°C), 100 mM de KCl, 1 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 0,2 mg/ml de BSA, 50 % de glycérol
    GAGCT.C
    Liquide
    Suggestions de produits

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    Vidéos
    Sécurité et traitement

    Sécurité et traitement

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    • OPTIZYME

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