Invitrogen™ NativePAGE™ 3 à 12 %, Bis-Tris, 1,0 mm, minigels de protéine

Description

Le système de gel Bis-Tris Invitrogen NativePAGE est un système de mini-gel préfabriqué en polyacrylamide qui fournit une analyse sensible et à haute résolution des protéines et des complexes protéiques natifs pour les estimations de masse moléculaire et l’évaluation de la pureté. Il est basé sur la technique d’électrophorèse sur gel de polyacrylamide bleu en conditions natives (BN PAGE) mise au point par Schägger et von Jagow, qui surmonte les limites de l’électrophorèse native classique en offrant un pH de fonctionnement proche de la neutralité et une compatibilité avec les détergents.

Caractéristiques du système sur gel NativePAGE Bis-Tris :
• Large éventail de poids moléculaire de 15 à 10 000 kDa
• Séparation du pH neutre qui préserve mieux l’état natif des complexes protéiques
• Résolution de toutes les protéines présentes dans le gel, quel que soit leur point isoélectrique (pHi)
• Possibilité d’analyser les complexes de protéines membranaires dans leurs conformations natives
• Possibilité d’obtenir une meilleure résolution qu’avec l’électrophorèse native traditionnelle Tris-Glycine

Fonctionnement des gels Bis-Tris NativePAGE
Dans SDS-PAGE, le SDS fonctionne comme une molécule à déplacement de charge qui dénature les protéines en leur conférant une charge nette négative et permet aux protéines de migrer vers l’anode. Le système BN PAGE utilise la molécule Coomassie G-250 pour déplacer les charges, celle-ci se lie aux protéines et leur confère une charge négative sans les dénaturer. Le pH, proche de la neutralité, du système sur gel NativePAGE Bis-Tris stabilise au maximum les protéines et la matrice gélifiée, offrant une méthode très sensible d’analyse des complexes de protéines membranaires et une résolution des bandes supérieure aux systèmes sur gel tris-glycine classiques.

Pour le transfert de protéines vers une membrane, nous vous recommandons d’utiliser les tampons de transfert NuPAGE pour le transfert humide traditionnel et les membranes en PVDF. Le tampon de transfert NuPAGE maintient l’environnement à pH neutre établi lors de l’électrophorèse. Les membranes en nitrate de cellulose ne sont pas utilisables à des fins de transfert car elles lient le colorant Coomassie G-250 très étroitement. Le transfert semi-sec rapide peut également être effectué avec le buvard d’alimentation Invitrogen (PB0013) ou le transfert sec rapide avec le dispositif de transfert de gel iBlot 2 (IB21001) à l’aide de membranes en PVDF.