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Invitrogen™ MessageAmp™ II aRNA Amplification Kit
Amplifie aussi peu que 100 pg d’ARN d’entrée pour l’analyse GeneChip™
Marque: Invitrogen™ AMB17515
Includes: Le kit d’amplification d’aRNA MessageAmp™ II contient : Amorce T7 Oligo(dT), ArrayScript™ RT , inhibiteur de RNase, tampon de premier brin 10X, mélange dNTP, tampon de second brin, ADN polymérase, RNase H, mélange d’enzymes T7, tampon de réaction T7 10X, ATP T7 (75 mM), GTP T7 (75 mM), UTP T7 (75 mM), amorces de second cycle, et contrôle de l’ARN et second cycle (1 mg/ml d’ARN total HeLa). Tampon de lavage, tampon de liaison à l’ADNc, tampon de liaison à l’aRNA, cartouches de filtre d’aRNA, tubes de prélèvement d’aRNA, cartouches de filtre d’ADNc, tubes d’élution d’ADNc, eau exempte de nucléase et manuel d’instructions détaillé
Description
Vue d’ensemble du système
Le profilage de l’expression à l’aide de dosage de gènes est devenu la méthode la plus largement utilisée pour évaluer l’expression génétique à l’échelle de l’ensemble du génome. La principale limite de cette technologie est la nécessité de grandes quantités d’ARN pour l’hybridation de matrice. Cet obstacle est généralement surmonté en utilisant la transcription de l’ADNc (obtenue à partir d’échantillons d’ARN total) à base d’ARN polymérase T7 pour amplifier des quantités suffisantes d’ARNc. Cette méthode d’amplification constitue la base du kit d’amplification d’aARN MessageAmp II.
Un kit amélioré pour l’amplification de l’ADNc
ArrayScript RT est inclus dans le kit. Il s’agit d’une transcriptase inverse M-MLV rationnellement conçue, qui produit des rendements équivalents ou supérieurs d’ADNc pleine longueur par rapport à d’autres enzymes. L’utilisation d’ArrayScript RT et l’optimisation de la réaction de synthèse de l’ADNc à double brin entraîne une conversion accrue de l’ARNm en modèles d’ADNc double brin pleine longueur. De plus, étant donné que la transcription in vitro (IVT) utilise la technologie MEGAscript™, les temps d’incubation IVT sont réduits. Ces améliorations dans le kit MessageAmp II permettent également d’effectuer des réactions en deux cycles, ce qui facilite une amplification robuste de l’ARN total à partir d’échantillons aussi faibles que 100 pg.
Produits accessoires
Bio-11-UTP (No de catalogue AM8450) et Bio-16-UTP (No de catalogue AM8451) peuvent être utilisé dans les réactions d’amplification d’ARNa MessageAmp pour le marquage cible pour l’analyse GeneChip. Les Bio-UTP sont confirmés exempts d’activité endonucléase non spécifique, d’activité exonucléase et d’activité RNase, et sont testés fonctionnellement à l’aide du kit d’amplification de l’ARNa MessageAmp II.
- Amplification accrue : jusqu’à 5 000 fois
- Une plus grande sensibilité due à l’augmentation des rendements d’ADNc pleine longueur
- Analyse GeneChip avec aussi peu que 100 ng d’ARN d’entrée
- Le marquage efficace produit un pourcentage élevé des appels présents et de faibles rapports 3'/5'
- ArrayScript™ RT, une réaction de synthèse de l’ADNc à double brin spécifiquement conçue, et optimisée par transcriptase inverse M-MLV, est inclus
Marquage de matrice d’expression, analyse et génotypage d’expression de gènes, analyse de microarray, amplification d’ARN
Spécification
| Kit d’amplification aRNA | |
| Non | |
| ARN poly(A+), ARN total | |
| Ambion™, MessageAmp™ |
| Le kit d’amplification d’aRNA MessageAmp™ II contient une amorce T7 Oligo(dT), ArrayScript™ RT, un inhibiteur de RNase, un tampon de premier brin 10X, un mélange dNTP, un tampon de second brin, un ADN polymérase, du RNase H, un mélange d’enzymes T7, un tampon de réaction T7 10X, de l’ATP T7 (75 mM), du GTP T7 (75 mM), de l’UTP T7 (75 mM), des amorces de second cycle et un contrôle de l’ARN (1 mg⁄ml d’ARN total HeLa) qui sont tous stockés à –20°C. Le tampon de lavage, le tampon de liaison à l’ADNc, le tampon de liaison à l’aRNA, les cartouches de filtre d’aRNA, les tubes de prélèvement d’aRNA, les cartouches de filtre d’ADNc, les tubes d’élution d’ADNc, l’eau exempte de nucléase et le manuel d’instructions détaillé peuvent être stockés à température ambiante. | |
| ArrayScript™ | |
| Kit | |
| 100 réactions |