Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit for Sequencing, with One Shot™ TOP10 Electrocomp™ E. coli

Les kits incluent tout ce dont vous avez besoin pour cloner et sélectionner les vecteurs recombinants contenant le fragment de PCR de votre choix. Nous avons éliminé la majeure partie du site de clonage multiple du vecteur TOPO pCR4Blunt pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à une valeur aussi faible que 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TOPO pCR4Blunt comprend des sites pour quatre amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation de clones TOPO pCR4Blunt
Le vecteur TOPO pCR4Blunt contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes LacZα-ccdB pour une sélection positive et une sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI de flanquement pour l’excision simplifiée des produits de PCR clonés et un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les promoteurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage simplifié basé sur TOPO
Grâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer avec les cellules compétentes E. coli fournies.
Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TOPO pCR4Blunt utilisé dans ce kit est livré sans saillies pour une ligature efficace des produits PCR créés par relecture, des polymérases thermostables qui laissent des produits PCR avec des extrémités franches.
La norme en matière de clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple d’utilisation et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Kit de clonage par PCR Zero Blunt TOPO pour séquençage : options de kit
Le kit de clonage par PCR Zero Blunt TOPO pour séquençage peut être acheté avec diverses cellules compétentes offrant différents avantages en fonction de vos besoins :

• Clonage général : TOP10 (No de catalogue K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K2880-20, K2880-40)
• Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : DH5α-T1R (No de catalogue K2895-20)
• Croissance rapide : Mach1™-T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K2835-20)

• Obtenez plus de séquences : permet d’augmenter la séquence d’insert et de réduire la séquence de vecteur lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard
• Simplicité et rapidité : passez de la PCR aux clones en trois étapes en un temps de manipulation inférieur à 5 minutes
• Efficacité : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
• Résultats prouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
• VECTEUR : vecteur TOPO pCR4Blunt : Vecteur de clonage optimisé pour des résultats de séquençage améliorés
• MÉTHODE DE CLONAGE : Clonage TOPO : Ligature en cinq minutes basée sur la topoisomérase des produits PCR amplifiés par la polymérase de relecture avec extrémités franches au vecteur
• CELLULES COMPÉTENTES : Plusieurs options : faites votre choix parmi les kits qui proposent des cellules compétentes générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide
• Vecteur pCR4Blunt-TOPO : Optimisé pour le séquençage

Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de la méthylation, clonage PCR, ARNi, recherche sur l’épigénétique et l’ARN non codant, séquençage de l’ADN traité par bisulfite