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Invitrogen™ pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit, with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli
Utilisez une stratégie de clonage extrêmement efficace en 5 minutes pour cloner directionnellement un produit PCR sans extrémités franches en vecteur pour l’entrée dans le système Gateway ou MultiSite Gateway
Marque: Invitrogen™ K242020
600.60 EUR valable jusqu'au 2024-09-27
Utilisez le code promo "21650" pour bénéficier de cette offre.
Code nomenclature Nacres: NA.55
Informations supplémentaires : Poids : 0.00450kg
Includes: Vecteur pENTR / SD / D-TOPO, dNTP, solution saline, eau stérile, amorces de séquençage M13 universelles, E. coli chimiquement résistant OneShot TOP10, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle pUC19.
Description
- Les produits PCR à extrémités franches clonent directionnellement dans le vecteur d’entrée pENTR / SD / D-TOPO avec une efficacité supérieure à 90 % et incluent une séquence d’expression en amont de Shine-Dalgarno dans les procaryotes
- Les gènes clonés font rapidement la navette entre de multiples systèmes de vecteurs
- Des performances fiables
- Vecteur de clonage directionnel pour l’entrée dans le système Gateway et optimisé pour l’expression procaryote
- Pour accéder au système Gateway, amplifier par PCR le gène d’intérêt et ajouter le produit directement au vecteur pENTR / SD / D-TOPO chargé de la topoisomérase fournie. Incuber 5 minutes et transformer les cellules E. coli compétentes fournies
- Les clones d’entrée Gateway ainsi obtenus et contenant les sites attL sont prêts pour une recombinaison efficace avec les vecteurs de destination Gateway de choix
- Le vecteur pENTR / SD / D-TOPO comprend l’activateur translationnel T7 gène 10 et le site de liaison des ribosomes (RBS) pour une expression optimale des protéines natives après la recombinaison avec des vecteurs de destination procaryotes Gateway
- Peut également utiliser un vecteur pour l’expression dans d’autres systèmes hôtes en recombinant avec différents vecteurs de destination
- Le vecteur comprend des sites de séquençage d’amorces M13 et T7 et des sites de recombinaison attL flanquant le site d’insertion du produit PCR, permettant ainsi aux clones d’être facilement vérifiés par séquence et recombinés dans le choix des vecteurs de destination Gateway contenant l’attR
- Un gène de résistance la kanamycine et une origine pUC sont utilisés pour la sélection et la propagation en nombre élevé de copies dans E. coli
- Une saillie à quatre bases sur les paires de vecteurs avec une séquence à quatre bases conçue dans l’amorce sens utilisée dans la réaction PCR afin de fournir de la directionnalité à la réaction de ligature à la topoisomérase
Clonage, clonage Gateway
Spécification
Directional TOPO™ | |
20 reactions | |
Kit de clonage TOPO |
Le kit de clonage pENTR™⁄SD⁄D-TOPO™ contient le vecteur pENTR⁄SD⁄D-TOPO™, dNTP, solution saline, eau stérile, amorces de séquençage M13 universelles, E. coli chimiquement résistant OneShot™ TOP10, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle pUC19. Conserver les E. coli compétentes à -80°C. Conserver tous les autres composants à -20°C. | |
One Shot™ | |
pENTR |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.