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Invitrogen™ pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit, with One Shot™ Mach1™-T1R Chemically Competent E. coli
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Quantité:
20 réactions
Conditionnement:
1 pièce
Description
Includes
Vecteur TOPO prêt à l’emploi, dNTP, solution saline, eau stérile, amorces de séquençage M13 universelles, E. coli chimiquement résistant TOP10 ou Mach1-T1R, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle pUC19.
- Les produits PCR à extrémités franches clonent directionnellement dans le vecteur d’entrée pENTR™ / SD / D-TOPO™ avec une efficacité supérieure à 90 % et incluent une séquence d’expression en amont de Shine-Dalgarno dans les procaryotes
- Les gènes clonés font rapidement la navette entre de multiples systèmes de vecteurs
- Des performances fiables
- Pour accéder au système Gateway amplifier par PCR le gène d’intérêt et ajouter le produit directement au vecteur pENTR™ / SD SD / SD D-TOPO chargé de la topoisomérase fournie. Incuber 5 minutes et transformer les cellules E. coli compétentes fournies
- Les clones ainsi obtenus et contenant les sites attL sont prêts pour une recombinaison efficace avec les vecteurs de votre choix
- Le vecteur pENTR™ / SD SD / SD D-TOPO™ comprend l’activateur translationnel T7 gène 10 et le site de liaison des ribosomes (RBS) pour une expression optimale des protéines natives après la recombinaison avec des vecteurs procaryotes
- Utilise également un vecteur pour l’expression dans d’autres systèmes hôtes en recombinant avec différents vecteurs de destination
- Le vecteur comprend des sites de séquençage d’amorces M13 et T7 et des sites de recombinaison attL flanquant le site d’insertion du produit PCR, permettant ainsi aux clones d’être facilement vérifiés par séquence et recombinés dans le choix des vecteurs de destination contenant l’attR
- Un gène de résistance à la kanamycine et une origine pUC sont utilisés pour la sélection et la propagation en nombre élevé de copies dans E. coli
- Pas de purification PCR, de préparation de vecteurs ou d’autres étapes de manipulation longues d’ADN
- Une saillie à quatre bases sur les paires de vecteurs avec une séquence à quatre bases conçue dans l’amorce sens utilisée dans la réaction PCR afin de fournir de la directionnalité à la réaction de ligature à la topoisomérase
Clonage, clonage Gateway
Spécification
Spécification
| Méthode de clonage | Directional TOPO™ |
| Contenu et stockage | Chaque kit de clonage Directional TOPO™ pENTR contient l vecteur TOPO™ prêt à l’emploi et approprié, dNTP, solution saline, eau stérile, amorces de séquençage M13 universelles, E. coli chimiquement résistant TOP10 ou Mach1-T1R, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle pUC19. Conserver les E. coli compétentes à -80°C. Conserver tous les autres composants à -20°C. |
| Nbre de réactions | 20 reactions |
| Gamme de produits | One Shot |
| Type de produit | Kit de clonage TOPO |
| Quantité | 20 réactions |
| Vecteur | pENTR |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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