Thermo Scientific™ Kit d’enrichissement de phosphopeptides High-Select™ & Réactifs

Description

La spectrométrie de masse (MS) est un outil clé pour identifier les sites de phosphorylation des protéines et quantifier les changements de phosphorylation. Cependant, l’analyse MS de la phosphorylation des protéines est difficile en raison de la faible stœchiométrie, de l’hydrophilie élevée, de la mauvaise ionisation et de la fragmentation incomplète des phosphopeptides. En raison de la faible abondance relative des modifications de phosphorylation dans les échantillons de protéines complexes, l’enrichissement est essentiel pour une analyse MS efficace des phosphopeptides. Les kits d’enrichissement de phosphopeptides Fe-NTA et TiO₂ hautement sélectifs complètent nos réactifs de lyse, de réduction, d’alkylation et de digestion, ainsi que nos colonnes de fractionnement de peptides en phase inverse C18, de centrifugation en graphite et à pH élevé, afin de fournir un flux de travail complet pour l’enrichissement de phosphopeptides.

• Pratique : tampons préformulés pour faciliter l’utilisation dans la colonne de centrifugation (Fe-NTA et TiO₂) ou formats magnétiques (Fe-NTA) pour permettre le traitement parallèle de plusieurs échantillons
• Grande spécificité : récupère les phosphopeptides avec une sélectivité de > 90 %
• Meilleure récupération : enrichit plus de phosphopeptides totaux et uniques que d’autres résines disponibles sur le marché
• Couverture élevée : récupère des peptides avec des sites de phosphorylation uniques et multiples
• Évolutif : compatible avec l’automatisation, y compris l’utilisation de processeurs de particules magnétiques KingFisher

Kit d’enrichissement de phosphopeptides Fe-NTA High-Select enrichit les phosphopeptides à partir d’échantillons complexes à l’aide de résine de chélate de fer en colonnes de centrifugation. Chaque colonne peut enrichir les phosphopeptides de 0,5 à 5 mg de digestion des protéines totales comme échantillon de départ. Avec des tampons préformulés, la procédure améliorée et simplifiée enrichit jusqu’à 150 µg de phosphopeptides avec une sélectivité supérieure à 90 % en moins de 45 minutes.

Kit d’enrichissement de phosphopeptides TiO2 High-Select comprend 24 pointes de centrifugation en dioxyde de titane (TiO2) avec tampons optimisés pour faciliter la préparation de phosphopeptides enrichis. Chaque colonne peut enrichir les phosphopeptides de 0,5 à 3 mg de digestion des protéines totales comme échantillon de départ. Les tampons optimisés et la procédure simplifiée éliminent le besoin de pyrrolidine dans le tampon d’élution et le nettoyage ultérieur à l’aide de colonnes de centrifugation en graphite. L’utilisation de ce kit permet d’enrichir jusqu’à 150 µg de phosphopeptides avec une sélectivité supérieure à 90 %. Le TiO2 enrichit un ensemble unique de phosphopeptides qui complète le kit d’enrichissement de phosphopeptides Fe-NTA IMAC High Select.

Kit d’enrichissement de phosphopeptides magnétique Fe-NTA High-Select enrichit les phosphopeptides à partir d’échantillons complexes à l’aide de microbilles d’agarose magnétiques à chélate de fer. Chaque réaction est suffisante pour enrichir 250–1 000 µg de phosphopeptides à partir de 0,5–5 mg de digestion protéique totale comme échantillon de départ en moins de 45 minutes. Le kit peut également être utilisé pour enrichir des peptides chimiquement modifiés grâce à des groupes fonctionnels conçus pour être utilisés avec des résines de chromatographie d’affinité sur ions métalliques immobilisés.

Agarose magnétique Fe-NTA High Select a été spécialement conçue pour enrichir les phosphopeptides et les peptides chimiquement modifiés pour l’analyse MS. Nos microbilles superparamagnétiques de magnétite sans agrégation (Fe₃O₄) présentent une uniformité exceptionnelle pour des performances élevées grâce à des applications de purification manuelles et automatisées. L’agarose magnétique Fe-NTA est disponible séparément pour offrir une flexibilité dans la conception expérimentale.

Pour l’analyse haute résolution des phosphopeptides enrichis, la colonne LC recommandée pour la source Nanospray Flex est la colonne Acclaim PepMap 100 C18 LC (réf. nº 164942-164939) Pour la source EASY-Spray, la colonne LC recommandée est la colonne LC EASY-Spray C18 (n° de référence ES902 ou ES903). Les microbilles d’agarose magnétiques Fe-NTA High Select autonomes offrent une flexibilité d’échelle et de débit et peuvent être utilisées sur les plateformes manuelles et automatisées, y compris les processeurs de particules magnétiques KingFisher 96 et KingFisher Flex.