Molecular Probes™ Kits de marquage fluorescent des protéines

Description

Prêts à l’emploi en seulement 90 minutes, nos kits de marquage des protéines comprennent une colonne de centrifugation pré-emballée facile à utiliser pour éliminer les colorants libres et pour une récupération type supérieure à 85 %. Chaque kit contient suffisamment de réactifs pour 3 à 5 réactions de conjugaison de protéines. Nos kits fournissent de meilleurs résultats en raison d’une fluorescence de fond plus faible, d’une liaison non spécifique moindre et de flux de travaux plus faciles pour la conjugaison des protéines avec 16 fluorophores différents.

• Marquez par fluorescence jusqu’à 1 mg de protéines par réaction (trois réactions par kit)
• Marquez 0,5 à 3 mg par réaction avec le kit de marquage de protéines biotine DSB-X (cinq réactions par kit)
• Protéines marquées prêtes à l’emploi en 90 minutes (temps de manipulation ∼15 min)
• Purifiez rapidement les protéines en éliminant rapidement le colorant non lié à l’aide de colonnes de centrifugation pré-emballées pour une récupération > 85 %
• Comprend des instructions détaillées pour déterminer le degré de marquage

Chaque kit de marquage des protéines contient tout ce dont vous avez besoin pour effectuer 3 à 5 réactions de marquage distinctes et purifier les conjugués qui en résultent. Le colorant réactif est soit un ester de succinimidyle (SE), soit un ester de tétrafluorophényle (TFP) qui réagit efficacement avec les amines primaires des protéines pour former des conjugués protéiques stables de colorant. Chacun des flacons de colorant réactif fournis dans le kit est suffisant pour le marquage de 1 mg d’une variété de protéines purifiées, y compris les facteurs de croissance, les cytokines, les nanocorps, les enzymes, les molécules d’adhérence cellulaire et les anticorps.

Le marquage direct avec des fluorophores permet d’utiliser plusieurs anticorps primaires du même isotype (dérivés de la même espèce) dans la même expérience. Les protéines de stabilisation telles que la BSA doivent être retirées de l’échantillon avant le marquage.

Les différents kits de marquage des protéines
• Bleu fluorescent Alexa Fluor 350 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 346/442 nm
• Vert fluorescent Alexa Fluor 488 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 494/519 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser à l’argon de 488 nm et détecté sous filtres standard FITC/Cy2
• Jaune fluorescent Alexa Fluor 532 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 530/554 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Nd:YAG de 532 nm et détecté sous filtres standard Rhodamine 6G
• Orange fluorescent Alexa Fluor 546 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 554/570 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser He-Ne de 543 nm et détecté sous filtres standard TRITC/Cy3
• Orange fluorescent Alexa Fluor 555 :valeurs maximales d’excitation et d’émission de 555/565 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser He-Ne de 543 nm et détecté sous filtres standard TRITC/Cy3
• Orange rouge fluorescent Alexa Fluor 568 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 577/603 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Kr de 568 nm et détecté sous filtres standard Rhodamine Red/Cy3,5
• Rouge fluorescent Alexa Fluor 594 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 590/617 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Kr ou He-Ne de 594 nm et détecté sous filtres standard Texas Red
• Rouge lointain fluorescent Alexa Fluor 633 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 632/647 nm
• Rouge lointain fluorescent Alexa Fluor 647 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 650/668 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Kr ou He-Ne de 633 ou 635 nm et détecté sous filtres standard APC/Cy5.
• Rouge lointain fluorescent Alexa Fluor 660 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 663/690 nm
• IR proche fluorescent Alexa Fluor 680 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 680/700 nm
• Vert fluorescent Fluorescéine-EX : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 494/518 nm
• Oregon Green 488 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 496/524 nm
• Pacific Blue : colorant excité par le violet avec des valeurs maximales d’excitation et d’émission de 410/455 nm
• Texas Red-X : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 595/615 nm
• Biotine DSB-X : les conjugués peuvent être liés de façon réversible à des protéines de liaison à la biotine telles que la streptavidine ou l’avidine. La concentration (mg/ml) de la préparation d’anticorps marqués à la biotine DSB-X peut être déterminée en mesurant l’absorbance de l’échantillon dialysé à 280 nm et en divisant cette valeur par 1,3 ou 1,4 lorsqu’elle est mesurée en solution dans une cuve avec une longueur de trajet optique de 1 cm. La biotine DSB-X n’absorbe pas de manière significative à 280 nm.

Pour le marquage de plus petites quantités d’anticorps (∼100 µg), nous recommandons nos kits de marquage d’anticorps. Veuillez consulter le manuel de l’utilisateur du kit de marquage des protéines pour plus d’informations sur les protocoles, les poids moléculaires et le degré de marquage de chaque colorant.