Le contrôle endogène de l’ARNr 18S eucaryote Applied Biosystems™ (colorant VIC™ ⁄ sonde MGB, amorces limitées) est conçu comme un contrôle endogène. Lorsqu’il est utilisé avec d’autres dosages d’expression génétique, il permet la quantification de l’expression génétique relative dans des échantillons d’ADNc. La sonde est marquée avec le colorant VIC™, la sonde MGB et les amorces sont limitées. Peut être utilisé pour les réactions de PCR multiplexes ou uniplexes. Le contrôle endogène est à utiliser avec les dosages d’expression génétique TaqMan inventoriés et non inventoriés, les dosages d’expression génétique personnalisés et⁄ou les amorces et les sondes TaqMan™ personnalisées. Détails du dosage : Symbole de gène : 18S RefSeq : X03205.1 Emplacement de la sonde sur l’exon : NA Taille de l’amplicon : 187 ID de dosage TaqMan correspondant : Hs99999901_s1 Contrôles endogènes TaqMan™ Ne passez plus des mois à concevoir, formuler et tester les dosages grâce aux contrôles endogènes TaqMan™, à utiliser comme contrôles de quantification de l’expression génétique. Cette collection pratique d’ensembles de sondes et d’amorces préconçues vous permet de normaliser la quantité d’ARN ou d’ADN de l’échantillon dans une réaction. Solution complète pour l’expression génétique quantitative Il vous semble difficile de décider quels contrôles utiliser pour quantifier l’expression génétique, même avec des informations détaillées sur les systèmes biologiques ? Maintenant, grâce aux contrôles endogènes TaqMan™, vous pouvez éviter de tâtonner lors de la sélection des contrôles pour la plupart des gènes eucaryotes, humains, de souris, de rat courants. Simple d’utilisation Tous les composants des contrôles endogènes TaqMan™ sont testés CQ, formulés en un seul mélange 20X et testés fonctionnellement. Les contrôles sont non seulement simples à utiliser, mais ils sont également complètement compatibles avec les conditions universelles de la RT-PCR en deux étapes. Il vous suffit d’ajouter le Master Mix pour PCR universelle TaqMan™ (avec ou sans AmpErase™ UNG) et votre échantillon d’ADNc pour générer des données d’expression génétique sensibles, reproductibles et véritablement quantitatives sur les instruments Applied Biosystems, y compris les systèmes de PCR en temps réel 7900HT, 7300, 7500 et les systèmes de détection de séquences 7000 et 7700. Offre flexible Nous fabriquons chaque contrôle endogène à l’aide de notre chimie de nucléase 5’ éprouvée. Pour un maximum de flexibilité, vous pouvez choisir entre deux colorants rapporteurs et deux absorbeurs, comme suit :
Une sonde TaqMan™ MGB marquée au colorant FAM™ (250 nM, concentration finale) et deux amorces de PCR non marquées (900 nM chacune).
Une sonde TaqMan™ MGB marquée au colorant VIC™ (250 nM, concentration finale) et deux amorces de PCR non marquées (150 nM chacune, amorces limitées).
Une sonde TAMRA™ marquée au colorant VIC™ (250 nM, concentration finale) et deux amorces de PCR non marquées (150 nM chacune, amorces limitées) Choisir le bon contrôle endogène Les contrôles endogènes peuvent normaliser les niveaux d’expression des gènes cibles en corrigeant les différences de quantité d’ADNc chargé dans les puits de la réaction de PCR. Pour optimiser les résultats, vérifiez que le contrôle endogène est exprimé de manière homogène dans l’ensemble d’échantillons à tester. L’expression du contrôle endogène doit être uniforme dans tous les échantillons de l’étude. Pour le multiplexage, assurez-vous que le niveau d’expression génétique du contrôle endogène est supérieur à celui de la cible. PCR multiplexe vs PCR uniplexe Tous les contrôles endogènes TaqMan™ qui contiennent des sondes marquées au colorant rapporteur VIC™ sont limités par des amorces. Ceci permet le multiplexage des contrôles endogènes TaqMan™ avec les dosages d’expression génétique cibles, à condition que le gène de contrôle soit exprimé plus abondamment que le gène cible. Les contrôles endogènes TaqMan™ contenant des sondes marquées au colorant rapporteur FAM™ ne sont pas tous limités par des amorces et ne sont pas tous destinés au multiplexage.
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