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Invitrogen™ BACE1 (β-Secretase) FRET Assay Kit, red
Kit de dosage de FRET du BACE1 (ß-secrétase), rouge
Marque: Invitrogen™ P2985
Code nomenclature Nacres: NA.32
Informations supplémentaires : Poids : 3.18000kg
Description
BACE1 (β-secrétase) est une enzyme clé impliquée dans la production de bêta-peptides amyloïdes (Abêta) présents dans les plaques amyloïdes extracellulaires de la maladie d’Alzheimer (AD). Dans certains cas, l’AD familiale précoce peut être attribuée à une mutation suédoise au sein de la protéine précurseur amyloïde (APP), ce qui améliore considérablement le clivage de cette protéine par BACE1. Cette preuve génétique et d’autres preuves pathologiques ont conduit à des approches thérapeutiques axées sur l’inhibition de BACE1 et d’autres enzymes de clivage APP, telles que la gamma-secrétase. Le kit de dosage de transfert d’énergie par résonance de fluorescence (FRET) du BACE1 fournit une méthode sensible et efficace pour la sélection des inhibiteurs potentiels BACE1. Ce kit utilise le BACE1 purifié exprimé par baculovirus et un nouveau substrat peptidique de FRET rouge basé sur le mutant suédois.Le kit de dosage de FRET du BACE1 offre :
Le principe du dosage de FRET du BACE1 est le suivant : Le substrat peptidique est synthétisé avec deux fluorophores, un donneur fluorescent (un dérivé de rhodamine (Rh)) et un accepteur exclusif d’extinction. La distance entre ces deux groupes a été sélectionnée pour que, lors de l’excitation par la lumière, l’énergie de fluorescence du donneur (D) soit significativement absorbée par l’accepteur (A) par un phénomène mécanique quantique connu sous le nom de transfert d’énergie de résonance (figure 1). Lors du clivage par la protéase, le fluorophore est séparé du groupe d’extinction, ce qui rétablit le rendement de fluorescence complet du donneur. Ainsi, un substrat peptidique faiblement fluorescent devient très fluorescent lors du clivage enzymatique ; l’augmentation de la fluorescence est linéairement liée au taux de protéolyse.
Source de l’enzyme BACE1 :
une séquence d’ADNc codant les acides aminés 1-460 du BACE1 humain, correspondant à l’ectodomaine, a été exprimée dans des cellules d’insectes recombinantes infectées par le baculovirus. Le BACE1 purifié existe sous forme de proBACE1 ayant un poids moléculaire apparent de 55 kDa et une séquence du TQHGIRLPLR à l’extrémité N-terminale.
Spécification
Les composants du kit de dosage de FRET du BACE1 sont répertoriés dans le tableau 1. Un réactif suffisant est fourni pour 400 dosages cinétiques ou de point final à haut débit. L’enzyme BACE1 est également disponible séparément. Conservez l’enzyme BACE1 à -80°C. Conservez le substrat BACE1 et l’étalon de produit BACE1 à -20°C. Évitez de soumettre ces composants à des cycles de congélation-décongélation répétés. Le tampon de dosage BACE1 et la solution d’arrêt BACE1 peuvent être décongelés dès réception et conservés à température ambiante. | |
Kit de dosage FRET | |
Substrat de bêta-secrétase | |
400 dosages de 40 µl | |
Bêta-secrétase (BACE1) |
Dosage β-secrétase | |
Substrat à base de peptides | |
FRET | |
Glace carbonique |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.