Boîtes de culture cellulaire - Foire aux questions
1. Combien de cellules dois-je ensemencer pour démarrer une culture cellulaire ?
Comme les cellules prolifèrent après l'ensemencement, il n'est pas recommandé d'ensemencer les cellules de telle sorte que le rendement moyen par puits soit dépassé à 100% de confluence. En fonction du type de cellules, de leur taille, de leur taux de croissance et du nombre de jours de votre expérience, vous pouvez démarrer votre culture cellulaire avec différentes densités d'ensemencement. Vous trouverez ci-dessous les densités d'ensemencement recommandées dans différentes boîtes de culture cellulaire. Le nombre de cellules sur une plaque ou un plat confluent varie en fonction du type de cellule. Des cellules HeLa ont été utilisées pour ce tableau. Les apports optimaux pour vos lignées cellulaires spécifiques peuvent être déterminés par des tests de croissance initiaux.
Plats | Surface (cm2) | Densité d'ensemencement | Cellules à confluence |
|---|---|---|---|
35mm | 8.8 | 0.3 x 106 | 1.2 x 106 |
60mm | 21.5 | 0.8 x 106 | 3.2 x 106 |
100mm | 56.7 | 2.2 x 106 | 8.8 x 106 |
150mm | 145 | 5.0 x 106 | 20.0 x 106 |
Plaques | Surface (cm2) | Densité d'ensemencement | Cellules à confluence |
|---|---|---|---|
6-well | 9.6 | 0.3 x 106 | 1.2 x 106 |
12-well | 3.5 | 0.1 x 106 | 0.5 x 106 |
24-well | 1.9 | 0.05 x 106 | 0.24 x 106 |
48-well | 1.1 | 0.03 x 106 | 0.12 x 106 |
96-well | 0.32 | 0.01 x 106 | 0.04 x 106 |
2. Comment puis-je choisir la bonne surface de croissance pour mes cultures cellulaires ?
Le polystyrène optiquement clair et non traité avec une surface hydrophobe est idéal pour la culture de cellules en suspension. Il est également utile pour une variété de tests biochimiques. Une modification de surface standard pour la culture de tissus (TC) rend la surface du polystyrène plus hydrophile et permet une adhésion maximale pour un large éventail de types de cellules. Pour les cellules telles que les cellules primaires et les cellules sensibles qui ne se développent pas bien sur la surface normale des CT, vous pouvez utiliser des boîtes de culture cellulaire recouvertes de collagène ou de poly-lysine. Le collagène est d'origine animale, tandis que la poly-lysine est entièrement synthétique.
3. Les plaques et les plats de culture cellulaire ont-ils une date de péremption ?
Oui, ils en ont une. La date de péremption fait généralement référence à la garantie de stérilité. Il convient bien sûr de noter que la stérilité dépend également d'une manipulation correcte garantissant que l'emballage reste intact. Certains récipients de culture contiennent des substances ajoutées, comme la gélatine, qui peuvent se dégrader avec le temps. Il n'est pas recommandé d'utiliser ces types de récipients de culture cellulaire après la date d'expiration.